聚蔗糖Ficoll 400 25g

  聚蔗糖 Ficoll 400 是一种在生物化学和细胞生物学实验中广泛使用的高亲水性、高分支、高分子量的蔗糖聚合物。它主要用作密度梯度离心的介质，特别是用于分离和纯化活细胞（如淋巴细胞、外周血单核细胞）。

以下是关于 Ficoll 400 的详细介绍：

别名

聚蔗糖400

英文名称

Ficoll TM PM400

CAS 26873-85-8

储存条件 RT，有效期4年

理化性质

外观(性状)白色粉末

纯度99.00%

溶解性60mg/mL in water

平均分子量400000

稳定性： 溶液在 4°C 下可稳定数周。粉末在室温干燥条件下稳定。溶液 不能高压灭菌（高温会破坏其结构和粘度），通常通过过滤除菌。

使用注意事项：

       无菌操作： 细胞分离实验需要无菌条件。Ficoll 溶液需用 0.22 µm 滤膜过滤除菌。

       准确配制： 严格按照所需密度（重量/体积百分比）精确配制溶液，并用生理缓冲液（如 PBS）溶解。

       避免高温： 不要高压灭菌，避免长时间高温加热溶液。

       轻柔操作： 铺层和收集细胞层时要非常小心，避免破坏梯度或混合界面。

       离心参数： 严格按照推荐的速度、时间和温度离心（通常室温，不刹车或慢刹车）。

       细胞洗涤： 收集到的白膜层细胞通常含有残留的 Ficoll 和血浆蛋白，需要用缓冲液（如 PBS）洗涤数次。

产品仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

由于实验受多种因素影响具有不确定性，以上说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。

核心应用：密度梯度离心分离细胞 (Ficoll-Paque / Lymphoprep 原理)：

       最经典和最主要的应用是分离人外周血单个核细胞。

       原理：

将稀释的抗凝血（如全血）小心地铺在预先配置好的、密度约为 1.077 g/mL 的 Ficoll 400 溶液之上（通常是与泛影酸盐或碘克沙醇等密度更高的X射线造影剂混合以达到此精确密度）。这种混合溶液常被称为 Ficoll-Paque 或 Lymphoprep。

在离心力作用下（如 400 × g，30-40 分钟，不刹车），血液中的不同组分根据其密度进行分层：

 红细胞和粒细胞： 密度最高，离心后沉到管底，形成沉淀。

 Ficoll 溶液层： 密度约 1.077 g/mL。

外周血单个核细胞： 包括淋巴细胞和单核细胞，其密度略低于 1.077 g/mL。它们在离心过程中会停留在 Ficoll 溶液层与血浆层之间的界面上，形成一层明显的“白膜层”。

血浆： 密度最低，位于最上层，含有血小板。

       优点：

           高纯度： 能有效分离出高纯度的淋巴细胞和单核细胞。

           高活力： 低渗透压特性最大程度地保护了分离细胞的活力。

           相对简单快速： 是实验室分离PBMC的标准方法。

       其他细胞分离应用： 也可用于分离其他组织来源的细胞（如脾脏、淋巴结、骨髓），但需要根据目标细胞的密度调整 Ficoll 溶液的浓度（密度）。有时也用于分离某些亚细胞器或病毒颗粒。

 与其他密度介质的比较：

       Percoll： 由二氧化硅颗粒包被聚乙烯吡咯烷酮制成。形成的是连续梯度（自形成梯度），密度范围更宽（1.0 - >1.3 g/mL），粘度低于 Ficoll。更适合分离密度差异较小的细胞或亚细胞器。但其高渗透压需要等渗缓冲液来平衡。Ficoll 形成的是不连续梯度。

       OptiPrep / Nycodenz： 基于碘克沙醇，是非离子型、低粘度、低渗透压的介质。粘度远低于 Ficoll 和 Percoll，易于操作和稀释，对细胞毒性更低，应用范围更广（细胞、细胞器、病毒、脂蛋白等）。逐渐成为更优选的密度介质。

       蔗糖： 高渗透压，会严重损害细胞活力，通常只用于分离亚细胞器（如细胞核、线粒体、溶酶体）或病毒，不适用于活细胞分离。