标准型基质胶（无酚红）5mL

标准型基质胶是从富含胞外基质蛋白的EHS（Engelbreth-Holm-Swarm）小鼠肿瘤中提取出的可溶性基底基质。，蛋白浓度为8-12 mg/mL，可以应用于血管生成、体内成瘤、3D类器官培养以及肿瘤细胞侵袭等实验研究。其主要成分由层粘连蛋白（Laminin），Ⅳ型胶原（Col-Ⅳ），巢蛋白（Entactin）和硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（Heparan sulphate proteoglycans）等组成，同时还包含表皮生长因子（EGF）、转化生长因子（TGF-beta）、类胰岛素生长因子（IGF）、成纤维生长因子（FGF）、组织纤溶酶原激活物和EHS肿瘤自身含有的其他生长因子。在室温条件下，基质胶可快速聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的组成、结构以及物理特性和功能，可促进体外细胞如：上皮细胞、血管内皮细胞、黑色素瘤细胞以及干细胞等的增殖和分化，在研究细胞形态、生理功能、侵袭以及促进难成瘤细胞成瘤等方面具有重要作用。

• 基本信息

• 成分：本品不含酚红，主要成分包括约 60% 的层粘连蛋白、约 30% 的 IV 型胶原蛋白和约 8% 的巢蛋白，还含有硫酸肝素蛋白聚糖、血管内皮生长因子、转化生长因子 -β、表皮生长因子等蛋白聚糖以及生长因子。

• 外观：半透明淡黄色。

• 形态：标准型基质胶在 4℃下溶解为透明液体。

• 浓度：蛋白质浓度范围一般为 8-12mg/mL。

• 内毒素：含量较低，≤4.5 EU/mL。

• 凝胶时间：室温下 5-30 分钟可凝胶，当温度从 22℃升至 37℃时，凝胶形成速度加快。

• 产品特点

• 模拟体内环境：能在室温条件下快速聚合形成具有生物学活性的三维培养基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，为细胞提供类似于体内的生长环境。

• 广泛的细胞支持作用：可促进血管内皮细胞、上皮细胞、肝细胞、神经元、黑色素瘤细胞等多种细胞的附着、维持、生长与分化，适用于多种细胞类型的实验研究。

• 无酚红干扰：不含酚红，避免了酚红对实验结果的干扰，尤其适用于荧光检测、显色反应等需要颜色检测的实验，以及对细胞内信号通路、细胞因子等进行研究时，可更准确地分析实验结果。

• 质量可靠：经过严格的质量控制，每批次产品都要进行蛋白浓度、内毒素、凝胶、血管生成、肿瘤细胞 3D 培养、类器官培养、生物活性、无菌性等检测，确保产品质量稳定可靠。

• 
  

• 储存与运输
  

• 干冰运输，-20 ℃避光保存，有效期2年；避免反复冻融。初次解冻后请适当分装储存于-20 ℃冰箱，请不要储存于无霜冰箱中。

• 实验过程中，请将本产品全程保持在冰上，4℃恒温解冻，避免频繁开关冰箱门造成影响。如果产品出现凝固，则产品不可继续使用。

一、前期准备

1. 耗材与试剂预冷

• 实验所需的移液管、吸头、培养板（或培养皿）、稀释用的培养液（如 DMEM、PBS 等）需提前置于 4℃冰箱预冷，避免基质胶遇室温提前凝固。

• 准备冰浴（冰盒或碎冰），用于后续操作中维持基质胶的液态。

2. 基质胶解冻

• 从 - 20℃冰箱取出基质胶，立即置于冰中，转移至 4℃冰箱避光过夜（或 8-12 小时）缓慢解冻。禁止室温解冻或直接加热，以免破坏蛋白结构和活性。

• 若蛋白浓度较高，解冻时间可能延长，可轻轻涡旋小瓶（冰浴上操作）帮助分散，但避免剧烈震荡。

二、分装（若需）

• 解冻后的基质胶需在冰浴上操作：用预冷的移液管轻柔吸取，按单次实验用量分装至无菌离心管中（每管体积建议为实验常用量，如 50μL、100μL）。

• 分装后迅速盖紧盖子，标记后立即放回 - 20℃避光保存，避免反复冻融（最多冻融 1-2 次，否则会影响凝胶性能）。

三、实验操作（以细胞培养包被为例）

1. 稀释基质胶（可选）

• 根据实验需求，用预冷的培养液或 PBS 将基质胶稀释至所需浓度（如 1:5、1:10，具体浓度需参考细胞类型和实验目的，例如肿瘤侵袭实验可能需较高浓度，而细胞贴壁培养可适当稀释）。

• 稀释时在冰浴上轻柔混匀，避免产生气泡（气泡会影响凝胶均匀性）。

2. 包被培养板 / 皿

• 用预冷的移液管将稀释后的基质胶均匀加入培养板孔中（如 96 孔板每孔加 50-100μL，6 孔板每孔加 1-2mL，具体体积根据实验需求调整）。

• 加样后轻轻晃动培养板，确保基质胶均匀覆盖底部，避免边缘堆积。

3. 凝胶形成

• 将培养板置于 37℃、5% CO₂培养箱中孵育 30-60 分钟（具体时间取决于基质胶浓度和体积，浓度越高，凝胶越快），直至基质胶完全凝固（呈现半透明、坚实的状态）。

• 凝胶形成后，可直接使用，或用无菌 PBS 轻轻冲洗 1-2 次（去除未凝固的成分），再加入细胞悬液。

四、后续实验（如 3D 细胞培养、侵袭实验等）

• 3D 细胞培养：将细胞悬液直接加入凝固的基质胶上（或混合后共同凝胶），加入适量培养液，置于培养箱中培养，定期观察细胞形态和生长情况。

• 肿瘤侵袭实验（如 Transwell）：在 Transwell 小室上层铺基质胶并凝固，下层加入趋化因子，上层接种肿瘤细胞，培养后检测细胞穿透基质胶的能力。

• 类器官培养：将类器官种子细胞与基质胶混合，铺板后凝胶，加入培养基培养，基质胶可为类器官提供三维支撑和营养环境。

五、注意事项

1. 无菌操作：全程在超净工作台内进行，操作前对台面、耗材喷洒 70% 乙醇消毒，避免污染。

2. 温度控制：基质胶在 10℃以上易凝固，所有操作（分装、稀释、加样）必须在冰浴上进行，避免室温暴露时间过长。在使用本产品过成中，需注意所以与本产品直接接触的如：吸头、培养皿、培养板以及培养基等都应提前预冷或者冰冻。在取用过程中请勿用手直接接触瓶身，以免体温引起产品凝固。

3. 避免反复冻融：分装后尽快冻存，每次使用取出一管，剩余未用完的液态基质胶（4℃条件下）需在 30 天内使用，且不可再次冻存。

4. 凝胶判断：若不确定是否凝固，可轻轻倾斜培养板，基质胶不流动即为凝固完全；未凝固的基质胶呈液态，需延长孵育时间。

5. 兼容性：无酚红配方适用于荧光检测、比色法等实验，避免了酚红对显色或荧光信号的干扰，实验时可直接进行相关检测（如荧光显微镜观察、ELISA 等）。

6. 
   

重要提示

产品用途：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。

警告！产品对人体危害性未知，请遵循操作说明。穿戴适当的防护眼镜、衣服和手套！

• 适用范围

• 细胞培养：可用于与细胞增殖或分化相关的 2D 或 3D 培养，以及细胞形态学研究，为细胞提供更接近体内生理状态的生长环境，有助于维持细胞的正常形态和功能，促进细胞的生长和分化。

• 血管生成研究：常用于研究血管内皮细胞的迁移、增殖和分化，以及血管样结构的形成，如体外血管生成实验中的成管试验、成环试验等，是研究血管生成机制的重要工具。

• 肿瘤研究：在肿瘤细胞侵袭实验中，可模拟体内肿瘤细胞穿越基底膜的过程，研究肿瘤细胞的转移能力；也可用于建立体内肿瘤模型，将肿瘤细胞与基质胶混合后接种到动物体内，观察肿瘤的生长和转移情况。

• 类器官培养：为类器官的生长提供必要的生长因子、蛋白质和所需的基质结构，支持类器官的生长和分化，常用于类器官的研究，有助于深入了解器官发育、疾病发生机制以及药物筛选等领域。