杂交瘤细胞无血清培养基(1L)

   本品是一款化学成分界定的细胞培养基，不含动物源成分，可以用杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞的培养以及抗体的表达。

1. 无动物源成分

• 化学成分明确：不含血清、动物蛋白或抗生素，避免批次差异及病毒污染风险。

• 简化纯化流程：低蛋白或无蛋白配，减少抗体纯化步骤，提高单抗回收效率。

2. 高密度培养与高效表达

• 支持杂交瘤细胞（如SP2/0、NS-1）悬浮培养，细胞密度可达 5×10⁶~7×10⁶ cells/mL，抗体产量较传统含血清培养基提升30%-50%。

• 替代腹水生产法，缩短单抗制备周期。

3. 适用范围广

• 适用于小鼠骨髓瘤细胞（如SP2/0）、人淋巴细胞系及杂交瘤细胞的扩增与抗体生产，部分产品（如日水SFM-101）无需HAT选择即可用于克隆培养

- 关键特性：  

  - 无动物源成分：避免疯牛病病毒（TSE/BSE）风险，提供安全声明；  

  - 高密度培养：批培养活细胞密度达 8×10⁶ cells/mL，流加培养抗体产量显著提升；  

  - 工艺兼容性：干粉规格支持单批量 10万升 生产，批间一致性高（CPK > 1.33）；  

  - 驯化支持：可逐步降低血清含量，实现贴壁细胞向悬浮培养的无缝转换。  

- 长期稳定性：支持>15代无血清传代，适合抗体长期生产。 

使用方法

1. 细胞驯化（未适应无血清环境的细胞）

梯度降血清法（以24孔板为例）：

1. 初始接种：将含血清培养的杂交瘤细胞离心重悬于无血清培养基，接种至24孔板（密度：1×10⁵ cells/孔）7。

2. 血清梯度添加：按终浓度依次添加血清：10% → 5% → 2.5% → 1.25% → 0.5% → 07。

3. 筛选与传代：每阶段培养24小时，保留形态良好且抗体分泌正常的孔，稳定传代2次后进入下一梯度7。

优势：驯化周期缩短50%，抗体产量达100~300 mg/L

注意事项

1. 无菌操作与污染防控

• 全程在超净台操作，培养基使用前需0.22 μm过滤；开封后避免多次取用。

• 出现浑浊或异味立即弃用，疑似污染时进行支原体检测。

2. 成分稳定性与处理

• 沉淀问题：冻融后可能出现絮状物，轻微沉淀不影响使用（如纪宁生物产品）。

• 添加剂活性：细胞因子分装保存，避免反复冻融；完全培养基配制后1周内用完。

3. 细胞状态优化

• 生长缓慢：检查细胞密度是否过低（建议≥1×10⁶/mL），或补加 2mM L-谷氨酰胺（存放>3个月时）。

• 贴壁细胞处理：SP2/0等轻微贴壁细胞传代时不可吹打，需自然脱落或短暂胰酶消化。

4. 安全与适用范围

• 操作防护：穿戴实验服及手套，接触冻存管时佩戴面罩（防液氮爆炸风险）。

• 用途限制：仅限科研或体外诊断，不可用于临床治疗（除非标明GMP级）。

细胞冻存

- 冻存密度：  

  - 含血清冻存：15-20×10⁶ cells/mL（推荐40%培养基+50%FBS+10%DMSO）。  

  - 无血清冻存：30-40×10⁶ cells/mL（推荐45%培养基+45%上清+10%DMSO）。  

- 程序降温：使用冻存盒（-80°C 24h后转移至液氮）。  

重要提示

产品用途：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。