DMEM/F-12完全培养基（不含HEPES）

   DMEM/F-12 完全培养基（不含 HEPES）是一种常用的哺乳动物细胞培养体系，由DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium） 与F-12基础培养基按 1:1 比例混合，并添加血清、抗生素等成分制成。与含 HEPES 的版本相比，其核心差异在于依赖传统碳酸氢钠缓冲系统维持 pH 稳定，适用于对 HEPES 敏感或实验条件可严格控制 CO₂浓度的细胞培养场景，尤其在常规贴壁细胞、肿瘤细胞系等培养中应用广泛。产品使用便捷，无需额外添加其他成分，开盖即用。省去客户自行配液的麻烦和污染风险。

DMEM/F-12完全培养基的成分
成分为DMEM与F-12基础培养基（1:1混合）+ 10%胎牛血清 + 1%双抗，含L-谷氨酰胺、酚红，包含细胞生长所需的各种成分；不含 HEPES。

特点：

125mLx4小包装规格，随用随取。

无需额外添加，开盖即用，方便快捷。

无菌，无病毒，无支原体，低内毒素。

无需再次配置，减少污染风险。

一、基础成分
基础培养基是完全培养基的功能基础，不含 HEPES 的 DMEM/F-12 具有以下关键特征：

1. 营养成分互补

• 融合了 DMEM 与 F-12 基础培养基的优势。

• DMEM：提供高浓度氨基酸、维生素和葡萄糖（常规为 4.5 g/L，部分低糖版本 1.0 g/L），为细胞快速增殖提供支持。

• F-12：富含微量元素（如锌、铜、硒）、核苷（如腺嘌呤、次黄嘌呤）和有机酸盐，满足细胞复杂的代谢需求。

• 综合优势：二者按 1:1 比例混合，营养组成更为均衡，可广泛适应多种细胞的生长。

2. 依赖碳酸氢钠缓冲系统

• 基础培养基中含有碳酸氢钠（通常浓度为 1.2-2.2 g/L）。

• 缓冲作用依赖于培养环境中的 5%-10% CO₂ 浓度，通过 “碳酸氢钠-CO₂” 平衡机制来维持培养基 pH 在 7.2-7.4。

• 系统优势：该系统更接近生理环境，对部分细胞的生理功能影响更小。

3. 无 HEPES 干扰

• 避免了 HEPES 缓冲剂可能带来的潜在影响。

• 适用于对 HEPES 敏感 的细胞（如部分原代细胞、神经细胞），可防止因 HEPES 毒性导致的细胞增殖抑制或分化异常。

二、添加组成
完全培养基在基础培养基的基础上添加以下关键成分，使其具备支持细胞生长的完整功能。血清、抗生素等特殊需求可支持定制。

1. 血清

• 类型：默认特级胎牛血清（其他等级可选）。

• 比例：默认添加 10%（可根据需求提供 5%-20% 的调整；无血清培养时可替换为血清替代物）。

• 作用：提供天然生长因子、激素、黏附因子及微量元素，促进细胞增殖与存活，并增强培养基缓冲能力。

2. 抗生素（可选）

• 常用组合：青霉素（100 U/mL）+ 链霉素（100 μg/mL）。

• 抗真菌选项：可添加两性霉素 B（0.25 μg/mL）。

• 注意：长期使用可能影响细胞活性，在洁净实验环境下可省略。

3. 其他补充物（可选）

• 谷氨酰胺：推荐终浓度 2 mM，为细胞提供氮源及能量代谢中间物。

• 特定生长因子：可根据细胞类型进行定制添加（如培养淋巴细胞时可添加 IL-2）。

三、适用细胞类型
DMEM/F-12 完全培养基（不含 HEPES）因营养均衡且无 HEPES 干扰，适用于多种常规细胞及对 HEPES 敏感的细胞：

• 肿瘤细胞系：如 HeLa（宫颈癌细胞）、A549（肺癌细胞）、MCF-7（乳腺癌细胞）等。

• 常规贴壁细胞：如成纤维细胞（NIH/3T3）、上皮细胞（MDCK）等。

• 对 HEPES 敏感的细胞：如部分原代神经元、胰岛 β 细胞。

• 干细胞培养（部分类型）：如间充质干细胞（MSC），可减少对其分化潜能的干扰。

使用注意事项

• CO₂浓度：需在 5% CO₂培养箱中使用，确保碳酸氢钠缓冲系统正常工作，维持 pH 稳定。

• 无需额外添加： 本产品为全营养组分的培养基，如无特别需要不用额外再添加血清和双抗，可以直接使用。

• 细胞适应性：若从其他培养基更换为本培养基，建议逐步过渡（如先混合 50% 旧培养基，再逐渐提高比例），避免细胞应激。

• 无菌操作：配制和使用过程严格无菌，避免污染（定期检测培养基是否浑浊、变色）。

• 储存条件：完全培养基：4℃避光保存，有效期三个月，避免反复冻融或长时间室温放置（防止营养成分降解和污染）。

• 重要提示

• 产品用途：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

• 由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。

DMEM/F-12 完全培养基（不含 HEPES）通过融合 DMEM 和 F-12 的营养优势，依托碳酸氢钠缓冲系统，为常规细胞及对 HEPES 敏感的细胞提供了接近生理环境的生长条件，尤其适合 CO₂浓度可严格控制的实验场景。