DMEM/F-12完全培养基（不含HEPES）

   DMEM/F-12 完全培养基（不含 HEPES）是一种常用的哺乳动物细胞培养体系，由DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium） 与F-12基础培养基按 1:1 比例混合，并添加血清、抗生素等成分制成。与含 HEPES 的版本相比，其核心差异在于依赖传统碳酸氢钠缓冲系统维持 pH 稳定，适用于对 HEPES 敏感或实验条件可严格控制 CO₂浓度的细胞培养场景，尤其在常规贴壁细胞、肿瘤细胞系等培养中应用广泛。产品使用便捷，无需额外添加其他成分，开盖即用。省去客户自行配液的麻烦和污染风险。

特点：

125mlx4小包装规格，随用随取。

无需额外添加，开盖即用，方便快捷。

无菌，无病毒，无支原体，低内毒素

无需再次配置，减少污染风险

一、基础成分

基础培养基是完全培养基的功能基础，不含 HEPES 的 DMEM/F-12 具有以下关键特征：

• 营养成分互补：融合 DMEM 和 F-12 的优势 ——DMEM 提供高浓度氨基酸、维生素和葡萄糖（常规为 4.5 g/L，部分低糖版本 1.0 g/L），支持细胞快速增殖；F-12 富含微量元素（如锌、铜、硒）、核苷（如腺嘌呤、次黄嘌呤）和有机酸盐，满足细胞代谢多样性需求。两者 1:1 混合后，营养更均衡，可适应多种细胞的生长需求。

• 依赖碳酸氢钠缓冲系统：基础培养基中含碳酸氢钠（通常浓度为 1.2-2.2 g/L），其缓冲作用依赖于培养环境中的 CO₂浓度（需 5%-10% CO₂），通过 “碳酸氢钠 - CO₂” 平衡（NaHCO₃ + CO₂ + H₂O ⇌ Na⁺ + HCO₃⁻ + H⁺）维持培养基 pH 在 7.2-7.4。该系统的优势是更接近生理环境（体内组织液中碳酸氢盐是主要缓冲成分），对部分细胞的生理功能影响更小。

• 无 HEPES 干扰：HEPES 虽能稳定 pH，但部分细胞（如某些原代细胞、神经细胞）对其敏感，高浓度时可能抑制增殖或影响分化。不含 HEPES 的配方可避免此类问题，适合对 HEPES 毒性敏感的实验。

二、添加组成

完全培养基在基础培养基的基础上添加以下关键成分，使其具备支持细胞生长的完整功能，血清，抗生素，HEPES等特殊需求可支持定制。

1. 血清（默认特级胎牛血清，其他等级胎牛血清可选）

• 作用：提供天然生长因子（如 EGF、胰岛素）、激素、黏附因子、微量元素等，促进细胞增殖和存活，同时增强培养基的缓冲能力。

• 默认添加比例：10%（部分敏感细胞需 5%-20%可选，如原代细胞；无血清培养时可替换为血清替代物）。

2. 抗生素（可选，预防污染）

• 常用组合：青霉素（100 U/mL）+ 链霉素（100 μg/mL），抑制细菌污染；若需抗真菌，可添加两性霉素 B（0.25 μg/mL）。

• 注意：长期使用可能影响细胞活性，清洁实验环境下可省略。

3. 其他补充物（可选）

• 谷氨酰胺：部分基础培养基不含或含不稳定的 L - 谷氨酰胺，需额外添加（终浓度 2 mM），为细胞提供氮源和能量代谢中间物。

  
  

• 特定生长因子：如培养淋巴细胞时添加 IL-2，根据细胞类型定制。

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5. 适用细胞类型

6. DMEM/F-12 完全培养基（不含 HEPES）因营养均衡且无 HEPES 干扰，适用于多种常规细胞及对 HEPES 敏感的细胞：

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8. 肿瘤细胞系：如 HeLa（宫颈癌细胞）、A549（肺癌细胞）、MCF-7（乳腺癌细胞）等，此类细胞增殖能力强，对缓冲系统依赖性较低，常规 CO₂环境即可满足需求。

9. 常规贴壁细胞：如成纤维细胞（NIH/3T3）、上皮细胞（MDCK）等，碳酸氢钠缓冲系统可稳定支持其贴壁生长和形态维持。

10. 对 HEPES 敏感的细胞：如部分原代神经元、胰岛 β 细胞，HEPES 可能影响其功能表达（如胰岛素分泌、神经递质释放），不含 HEPES 的配方更适合。

11. 干细胞培养（部分类型）：如间充质干细胞（MSC）在低血清条件下，不含 HEPES 的环境可减少对其分化潜能的干扰。

使用注意事项

• CO₂浓度：需在 5% CO₂培养箱中使用，确保碳酸氢钠缓冲系统正常工作，维持 pH 稳定。

• 无需额外添加： 本产品为全营养组分的培养基，如无特别需要不用额外再添加血清和双抗，可以直接使用。

• 细胞适应性：若从其他培养基更换为本培养基，建议逐步过渡（如先混合 50% 旧培养基，再逐渐提高比例），避免细胞应激。

• 无菌操作：配制和使用过程严格无菌，避免污染（定期检测培养基是否浑浊、变色）。

• 储存条件：完全培养基：4℃避光保存，有效期三个月，避免反复冻融或长时间室温放置（防止营养成分降解和污染）。

• 重要提示

• 产品用途：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

• 由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。

DMEM/F-12 完全培养基（不含 HEPES）通过融合 DMEM 和 F-12 的营养优势，依托碳酸氢钠缓冲系统，为常规细胞及对 HEPES 敏感的细胞提供了接近生理环境的生长条件，尤其适合 CO₂浓度可严格控制的实验场景。