McCoy's 5A完全培养基（含HEPES）

  McCoy's 5A 完全培养基（含 HEPES）是在经典 McCoy's 5A 完全培养基基础上，额外添加 HEPES 缓冲剂形成的优化配方。它保留了 McCoy's 5A 对原代细胞和敏感细胞的良好支持能力，同时通过 HEPES 增强了 pH 稳定性，更适合复杂培养环境或对缓冲能力要求较高的实验场景。

特点：

125mlx4小包装规格，随用随取。

无需额外添加，开盖即用，方便快捷。

无菌，无病毒，无支原体，低内毒素

无需再次配置，减少污染风险

一、基础成分

基础框架：McCoy's 5A 基础培养基

与普通 McCoy's 5A 一致，基础培养基包含：

• 营养成分：全面的必需氨基酸、非必需氨基酸（如谷氨酰胺）、高浓度叶酸、1 g/L 葡萄糖（低糖）、丙酮酸及矿物质，满足细胞代谢和增殖需求；

• 基础缓冲系统：含碳酸氢钠（约 2.2 g/L），依赖 CO₂环境维持 pH（常规 5%-10% CO₂），基础 pH 范围 7.2-7.4。

2. 关键添加物：HEPES 缓冲剂

• 作用机制：HEPES（4 - 羟乙基哌嗪乙磺酸）是一种两性离子缓冲剂，其缓冲范围主要在 pH 6.8-8.2，且不依赖 CO₂浓度，能在 CO₂波动或无 CO₂环境中稳定培养基 pH；

• 常规浓度：添加量通常为 10-25 mM（约 2.38-5.95 g/L），具体需根据培养需求调整（如开放式操作或长时间培养可适当提高浓度）。

二、添加组成

完全培养基在基础培养基的基础上添加以下关键成分，使其具备支持细胞生长的完整功能，血清，抗生素，HEPES等特殊需求可支持定制。

1. 血清（默认特级胎牛血清，其他等级胎牛血清可选）

• 作用：提供天然生长因子（如 EGF、胰岛素）、激素、黏附因子、微量元素等，促进细胞增殖和存活，同时增强培养基的缓冲能力。

• 默认添加比例：10%（部分敏感细胞需 5%-20%可选，如原代细胞；无血清培养时可替换为血清替代物）。

2. 抗生素（可选，预防污染）

• 常用组合：青霉素（100 U/mL）+ 链霉素（100 μg/mL），抑制细菌污染；若需抗真菌，可添加两性霉素 B（0.25 μg/mL）。

• 注意：长期使用可能影响细胞活性，清洁实验环境下可省略。

3. 其他补充物（可选）

4. 谷氨酰胺：部分基础培养基不含或含不稳定的 L - 谷氨酰胺，需额外添加（终浓度 2 mM），为细胞提供氮源和能量代谢中间物。

   主要优势

1. 核心优势：增强的 pH 稳定性与适用场景

2. 相比不含 HEPES 的 McCoy's 5A 完全培养基，其突出优势在于：

   
   

3. 抗 CO₂波动能力：当培养箱 CO₂浓度不稳定（如频繁开关门、设备故障）或进行短时开放式操作（如换液、加样）时，HEPES 可减少 pH 骤变对细胞的刺激；

4. 支持多样化培养环境：适用于无 CO₂培养箱、密闭容器培养，或需要长时间（超过 48 小时）不换液的实验（如某些细胞毒性检测、慢病毒感染）；

5. 保护敏感细胞：对 pH 变化敏感的原代细胞（如肝细胞、神经细胞）或肿瘤细胞系（如悬浮生长的淋巴瘤细胞），HEPES 可降低环境波动导致的生长抑制或凋亡。

使用注意事项

• CO₂浓度：需在 5% CO₂培养箱中使用，确保碳酸氢钠缓冲系统正常工作，维持 pH 稳定。

• 无需额外添加： 本产品为全营养组分的培养基，如无特别需要不用额外再添加血清和双抗，可以直接使用。

• 细胞适应性：若从其他培养基更换为本培养基，建议逐步过渡（如先混合 50% 旧培养基，再逐渐提高比例），避免细胞应激。

• 无菌操作：配制和使用过程严格无菌，避免污染（定期检测培养基是否浑浊、变色）。

• 储存条件：完全培养基：4℃避光保存，有效期三个月，避免反复冻融或长时间室温放置（防止营养成分降解和污染）。

• 重要提示

• 产品用途：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

• 由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。

适用细胞类型与实验场景

1. 敏感细胞培养

• 原代细胞：如原代成纤维细胞、上皮细胞、骨髓基质细胞等；

• 悬浮 / 半贴壁细胞：如淋巴细胞、Jurkat 细胞、某些白血病细胞系。

2. 特殊实验需求

• 长时间培养实验（如 7 天以上的原代细胞扩增）；

• 高频操作场景（如药物筛选中频繁加样、取样）；

• 野外或无 CO₂设备的临时培养（依赖 HEPES 维持 pH）；

• 病毒培养或转染实验（减少环境波动对病毒复制或转染效率的影响）。

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• 长期细胞培养（如原代细胞的传代扩展或功能维持实验）。