McCoy's 5A完全培养基（含HEPES）

  McCoy's 5A 完全培养基（含 HEPES）是在经典 McCoy's 5A 完全培养基基础上，额外添加 HEPES 缓冲剂形成的优化配方。它保留了 McCoy's 5A 对原代细胞和敏感细胞的良好支持能力，同时通过 HEPES 增强了 pH 稳定性，更适合复杂培养环境或对缓冲能力要求较高的实验场景。

McCoy‘s 5A完全培养基（含HEPES）的成分
成分为 McCoy‘s 5A 基础培养基+10%胎牛血清+1%双抗，含L-谷氨酰胺、HEPES缓冲剂、酚红，包含细胞生长所需的各种成分。

特点：

125mLx4小包装规格，随用随取。

无需额外添加，开盖即用，方便快捷。

无菌，无病毒，无支原体，低内毒素。

无需再次配置，减少污染风险。

一、基础成分
1. 基础框架：McCoy‘s 5A 基础培养基

• 营养成分：提供全面的必需与非必需氨基酸（含谷氨酰胺）、高浓度叶酸、低浓度葡萄糖（1 g/L）、丙酮酸及矿物质。

• 基础缓冲系统：含碳酸氢钠（约 2.2 g/L），依赖 5%-10% CO₂ 环境维持 pH 在 7.2-7.4。

2. 关键添加物：HEPES 缓冲剂

• 作用机制：为两性离子缓冲剂，在 pH 6.8-8.2 范围内起效，其缓冲能力不依赖 CO₂浓度。

• 常规浓度：通常添加 10-25 mM，可根据开放式操作或长时间培养等具体需求调整。

二、添加组成
完全培养基在基础培养基上已添加以下关键成分，支持定制。

• 血清：默认添加 10% 特级胎牛血清（比例 5%-20% 可调，支持无血清替代）。

• 抗生素（可选）：常用组合为青霉素（100 U/mL）与链霉素（100 μg/mL）。

• 其他补充物（可选）：可按需补充谷氨酰胺（终浓度 2 mM）或特定生长因子。

三、主要优势：增强的 pH 稳定性
相比不含 HEPES 的版本，本产品的核心优势在于：

• 抗 CO₂波动：在培养箱CO₂浓度不稳定或进行短时开放式操作时，能有效减少pH骤变。

• 支持多样化培养环境：适用于无CO₂培养箱、密闭容器培养或长时间不换液的实验。

• 保护敏感细胞：为对pH变化敏感的原代细胞或肿瘤细胞系提供更稳定的生长环境。

使用注意事项

• CO₂浓度：需在 5% CO₂培养箱中使用，确保碳酸氢钠缓冲系统正常工作，维持 pH 稳定。

• 无需额外添加： 本产品为全营养组分的培养基，如无特别需要不用额外再添加血清和双抗，可以直接使用。

• 细胞适应性：若从其他培养基更换为本培养基，建议逐步过渡（如先混合 50% 旧培养基，再逐渐提高比例），避免细胞应激。

• 无菌操作：配制和使用过程严格无菌，避免污染（定期检测培养基是否浑浊、变色）。

• 储存条件：完全培养基：4℃避光保存，有效期三个月，避免反复冻融或长时间室温放置（防止营养成分降解和污染）。

• 重要提示

• 产品用途：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

• 由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。

适用细胞类型与实验场景

1. 敏感细胞培养

• 原代细胞：如原代成纤维细胞、上皮细胞、骨髓基质细胞等；

• 悬浮 / 半贴壁细胞：如淋巴细胞、Jurkat 细胞、某些白血病细胞系。

2. 特殊实验需求

• 长时间培养实验（如 7 天以上的原代细胞扩增）；

• 高频操作场景（如药物筛选中频繁加样、取样）；

• 野外或无 CO₂设备的临时培养（依赖 HEPES 维持 pH）；

• 病毒培养或转染实验（减少环境波动对病毒复制或转染效率的影响）。

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• 长期细胞培养（如原代细胞的传代扩展或功能维持实验）。