HEK293细胞无血清培养基（病毒载体）1L

   HEK293 细胞因易于转染、能高效表达外源基因且可对病毒蛋白进行适当修饰，成为病毒载体（如腺相关病毒 AAV、慢病毒 Lentivirus、腺病毒 Adenovirus 等）生产的常用宿主细胞。而HEK293 细胞无血清培养基（病毒载体专用） 是专为该细胞在病毒载体生产场景中设计的培养基，通过去除血清成分并优化配方，兼顾细胞生长、病毒载体复制及产量提升，在基因治疗等领域具有关键作用。

配方特点

这类培养基的核心功能是支持 HEK293 细胞（贴壁或悬浮培养）的高密度生长，同时为病毒载体的包装、组装和释放提供适宜微环境。其配方在通用 HEK293 无血清培养基基础上进一步优化，特点包括：

• 营养强化：富含细胞快速增殖所需的氨基酸（如谷氨酰胺）、能量物质（葡萄糖、丙酮酸）及核苷酸前体，满足病毒复制时的高代谢需求；

• 低干扰成分：不含血清中的病毒抑制因子（如某些补体成分）和杂蛋白，避免对病毒载体组装的干扰；

• 功能性添加物：可能包含促进病毒释放的表面活性剂（如低浓度 Pluronic F-68）、维持细胞存活的抗氧化剂（如谷胱甘肽），或调节细胞周期的因子（部分型号），以提高病毒载体滴度。

核心优势

1. 提高病毒载体纯度与安全性
   血清中含大量动物来源蛋白、脂质及潜在病原体（如支原体、内毒素），会混入病毒载体产物，增加下游纯化难度（如密度梯度离心时的干扰），且不符合基因治疗的临床级安全要求（避免免疫原性风险）。无血清培养基背景清晰，可显著降低杂质残留，使病毒载体更易达到临床级纯度标准。

2. 提升病毒载体产量与稳定性
   血清成分复杂且批次差异大，可能抑制病毒复制（如某些血清批次含腺病毒中和抗体），导致病毒滴度波动。无血清培养基成分固定，可稳定支持细胞密度提升（部分悬浮培养体系细胞密度可达 1×10⁷ cells/mL 以上），并减少对病毒复制的干扰，使病毒滴度（如 AAV 的 GC/mL、慢病毒的 TU/mL）更稳定，批次间差异显著降低。

3. 适配大规模工业化生产
   病毒载体生产需从实验室规模（摇瓶）扩展至生物反应器（50-2000L），含血清培养基因黏度高、易产生泡沫，且血清成本高（尤其大规模使用时），不适合放大。无血清培养基流动性好，易适配搅拌式生物反应器的悬浮培养，且成本可控，支持高密度、高滴度的规模化生产。

4. 符合法规与质控要求
   基因治疗药物需通过 FDA、EMA 等监管机构审批，对 “动物来源成分” 的限制严格（如避免疯牛病风险）。无血清培养基（尤其是化学成分明确型）的所有成分来源可追溯，更易通过法规审查，简化质控流程。

储存方法

 2–8°C储存期为3个月；-20°C冷冻可延长至12个月。

使用注意事项

1. 细胞适应与驯化
   从含血清培养基转至无血清培养基时，需逐步降低血清浓度（如 10%→5%→2%→0），每步适应 2-3 代，避免细胞因营养应激死亡。悬浮培养的 HEK293 细胞（如 HEK293F、HEK293T）通常更易适应。

2. 与转染试剂的兼容性
   病毒载体生产需通过转染（如脂质体、PEI）将质粒导入细胞，部分无血清培养基可能影响转染效率（如高浓度钙离子可能干扰 PEI 复合物形成），需提前测试培养基与转染试剂的兼容性，或选择厂商推荐的配套体系（如某些品牌提供 “培养基 + 转染试剂” 套装）。

3. 培养参数优化

1. 溶氧：病毒复制阶段对溶氧敏感，需维持在 30%-50%；

2. pH：通常控制在 7.2-7.4，避免过酸或过碱影响病毒稳定性；

3. 温度：多数病毒载体生产在 37℃，但部分慢病毒可在 32℃下获得更高滴度，需根据载体类型调整。

重要提示

产品用途：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。

主要应用场景

1. 适用的病毒载体类型

2. 腺相关病毒（AAV）：HEK293 细胞是 AAV 包装的金标准宿主（需共转染 Rep/Cap 基因和辅助病毒质粒），专用无血清培养基可提升 AAV 的包装效率和完整病毒颗粒比例；

3. 慢病毒（Lentivirus）：常用于基因编辑和细胞治疗，无血清培养可减少病毒载体中的外源蛋白污染，降低体内应用时的免疫反应风险；

4. 腺病毒（Adenovirus）：在疫苗和基因治疗中应用广泛，无血清培养基可支持 HEK293 细胞在感染后维持存活，提高病毒释放量；

5. 其他病毒载体：如逆转录病毒、疱疹病毒等，部分专用培养基也可适配。