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热灭活胎牛血清(100mL)

  • 英文名:Fetal Bovine Serum(FBS) Heat Inactivatedalified
  • 产品价格:¥1196

简要描述:热灭活胎牛血清(Fetal Bovine Serum Heat-Inactivated , HI-FBS)是经过56°C水浴30分钟处理的胎牛血清(FBS)。这个处理过程的主要目的是灭活血清中的补体系统。

品牌 EanGul/研谷 货号 A2001E
规格 100mL 价格 1196
供货周期 现货 说明书 点击下载

产品介绍:

    胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)是从胎牛血液中分离提纯的血清,富含蛋白质、生长因子、激素、矿物质等多种营养成分,是细胞培养中最常用的天然培养基添加剂,能为细胞提供生长、增殖所需的环境和营养。
    热灭活胎牛血清则是对原始胎牛血清进行56℃、30 分钟的恒温加热处理后得到的血清。这一过程称为 “热灭活”,是血清处理的常见方式之一

热灭活的主要目的

      热灭活并非简单的消毒,其核心作用是去除血清中可能干扰细胞培养的活性成分,具体包括:


  1. 灭活补体系统:补体是血清中一组具有酶活性的蛋白质,参与免疫反应,若未灭活,可能导致细胞溶解、凋亡,或干扰细胞黏附、增殖(尤其对免疫细胞、干细胞等敏感细胞影响显著)。

  2. 灭活病毒和支原体:虽然原始血清已通过过滤等步骤去除大部分微生物,但热灭活可进一步降低潜在的病毒(如牛病毒性腹泻病毒)和支原体污染风险(但并非绝对可靠,需配合其他质控手段)。

  3. 破坏某些不耐热的酶类:如血清中的某些蛋白酶,可能分解细胞外基质或营养成分,影响细胞生长。

  4. 促进血清成分沉淀去除:热灭活可能使血清中部分不稳定蛋白沉淀,通过离心去除后可减少对细胞的干扰。

特点

  • 优点

    • 降低补体、病毒等对细胞的潜在危害,提高细胞培养的稳定性(尤其适用于依赖低免疫干扰环境的细胞,如杂交瘤细胞、淋巴细胞)。

    • 部分细胞(如昆虫细胞、某些肿瘤细胞)在热灭活血清中生长状态更稳定。

  • 缺点

    • 高温可能破坏血清中的敏感营养成分,如部分生长因子(如表皮生长因子 EGF)、维生素等,导致血清营养价值略有下降。

    • 可能导致血清中部分蛋白质变性沉淀,形成肉眼可见的颗粒,需离心去除后使用,否则可能影响细胞贴壁。


储存事项

运输条件:干冰或其他条件低温冷冻运输。

储存条件:贮藏温度-10℃~-20℃。

 


使用说明

一、解冻操作规范

  1. 解冻环境要求:需在 4℃冰箱中解冻,不建议室温或水浴加热解冻。若血清经干冰运输或在 - 80℃条件下存放,需先转移至 - 20℃冰箱暂缓 24 小时,再放入 4℃冰箱解冻。注意:解冻温度过高或温差过大,会导致血清蛋白析出、沉淀增多、品质下降、蛋白活性降低,同时增加变质及污染风险。

  2. 解冻过程辅助:4℃解冻中后期可适当轻摇,以加快融化速度,使温度更均匀,减少沉淀析出。需避免激烈摇晃,防止产生大量气泡。也可使用摇床加速解冻,转速建议设定为 100~200 rpm(转速过高可能导致细胞损伤或血清起泡)。

  3. 解冻时间参考:以 500ml 包装为例,4℃解冻时间一般为 24 小时左右,小包装解冻时间会相应缩短。

二、存放与分装要求

  1. 短期存放:解冻完成后,若短期内使用,可密封短期放4℃冰箱保存。不建议长期存放,密封条件下液体状态存放不得超过 2 周。

  2. 分装冻存:解冻后应及时分装成合适体积并重新冻存,避免反复冻融。分装过程操作及所使用的容器必须严格无菌。可选用本公司免分装50mlx10包装产品。

三、解冻后常见现象及处理

  1. 颜色不均匀:若解冻过程中一直静置未摇匀,血清解冻后可能出现上下层颜色不均匀,此为正常现象,分装或使用前摇匀即可。

  2. 外观异常判断:解冻完全后,正常血清应澄清透亮,颜色偏红黄。如发现血清浑浊、颜色变黑或出现其他异常,需在开封前联系本公司确认。

  3. 蛋白析出处理:部分血清解冻后会出现蛋白析出,属于正常现象。可让析出物留在瓶底,或用网筛过滤;也可将血清分装至无菌离心管中,稍加离心后取上清液,直接加入培养基混合后再过滤使用。具体析出问题及解决方案可参照官网技术文章栏目关于胎牛血清沉淀问题”。

四、使用浓度与细胞适应

  1. 常规使用浓度:基础培养基中胎牛血清的使用浓度一般为 5%~20%,具体浓度需根据细胞种类及实验需求调整。

  2. 细胞适应期管理:不同细胞对血清敏感度不同,部分细胞对血清有依赖性。更换血清时,需为细胞提供过渡适应期,可通过以下方式实现:

  • 调整新旧血清比例,如新旧血清各添加 5%;

  • 提高血清用量,如旧血清原始使用量为 10%,新血清可增加至 12%~15%。

五、特殊处理与成分添加

  1. 无菌与处理建议:本品已通过无菌处理,若无特殊要求,解冻后可直接使用,无需再次过滤、辐照或热灭活处理(辐照及热灭活会破坏血清营养物质,影响使用效果)。如有特殊实验需求,建议购买本公司成品特殊处理血清,不建议自行处理。

  2. 额外成分添加:本品未额外添加因子、激素及抗生素等成分。若实验有特殊要求,需在配置完全培养液时自行添加至培养基中,禁止将上述成分直接加入血清,以免引起 PH 值、渗透压变化及未知成分反应。

六、操作与安全规范

  1. 无菌操作:使用时需严格遵守无菌操作规范,防止细菌及其他污染。操作时应穿实验服,佩戴一次性手套。

  2. 使用限制:产品仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

七、说明与解释权

由于实验受多种因素影响存在不确定性,以上说明仅供参考,最终解释权归本公司所有。



数据及应用

适用场景

1. 避免补体介导的细胞毒性的免疫学相关研究、培养某些免疫细胞以及培养对补体敏感的细胞(如一些杂交瘤细胞、干细胞、原代细胞)

2. 特定细胞培养如干细胞培养(以消除补体对干细胞活性和分化潜能的潜在不利影响)、杂交瘤细胞培养(因为未灭活的补体可能裂解这些细胞)。

3. 某些转染实验,未灭活的补体有时会干扰转染效率或导致细胞毒性。使用灭活可以降低这种风险,提高实验的一致性和成功率。

4. 一些病毒相关实验,能够降低补体对病毒颗粒的中和作用(如疫苗开发)。

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